油紅O脂肪染色

　　油紅O脂肪染色法是指在日常病理診斷和科研工作中為了顯示組織內(nèi)的脂肪常采用油紅O進(jìn)行染色的方法，油紅O為脂溶性染料，在脂肪內(nèi)能高度溶解，可特異性的使組織內(nèi)甘油三酯等中性脂肪著色。

      油紅O脂肪染色服務(wù)詳細(xì)介紹：

       2. 改良的油紅O染色液 油紅O 0. 5g, 50%乙醇100ml。將油紅O溶于乙醇內(nèi),且不斷攪拌至*溶解即可。配制好的染液置磨口瓶?jī)?nèi)保存?zhèn)溆谩?/p>

       3. 染色步驟 ①切片干燥后入50%乙醇稍洗;②油紅O乙醇染液作用8min;③50%乙醇分化,自來(lái)水終止分化;④蘇木素復(fù)染核,自來(lái)水返藍(lán),甘油明膠封片.油紅O染色法×400

　　油紅0脂肪染色法是指在日常病理診斷和科研工作中為了顯示組織內(nèi)的脂肪常采用油紅0進(jìn)行染色的方法，油紅0為脂溶性染料，在脂肪內(nèi)能高度溶解，可特異性的使組織內(nèi)甘油三酯等中性脂肪著色。

　　正常情況下，除脂肪細(xì)胞外其他細(xì)胞內(nèi)-般不見(jiàn)或僅見(jiàn)少量脂滴。在病理狀態(tài)下如這些細(xì)胞中出現(xiàn)脂滴或脂滴明顯增多，特別是在心、肝.腎等實(shí)質(zhì)器官發(fā)生脂肪變性時(shí)，胞漿內(nèi)出現(xiàn)大小不一的空泡， 這時(shí)常需鑒別空泡性質(zhì)，用脂肪染色來(lái)區(qū)分是脂肪變性還是水樣變性或糖原貯留。在動(dòng)脈粥樣硬化時(shí)，內(nèi)皮細(xì)胞下的脂質(zhì)沉著，用脂肪染色能將脂質(zhì)清晰地顯示出來(lái)。由脂肪組織病變所弓|起的脂肪栓塞可用脂肪染色顯示栓子內(nèi)的脂質(zhì)，從而確診脂肪栓塞。用于腫瘤組織的鑒別診斷，由脂肪組織所發(fā)生的腫瘤在與其他組織來(lái)源的腫瘤相區(qū)分時(shí)，可以借助脂肪染色，脂肪組織所發(fā)生的腫瘤，脂肪染色為陽(yáng)性。并可根據(jù)所顯示的細(xì)胞形態(tài)特點(diǎn)與類(lèi)似腫瘤進(jìn)行鑒別，腎透明細(xì)胞癌與腎上腺瘤，卵巢纖維瘤與卵泡膜細(xì)胞瘤。皮脂腺瘤與鱗狀細(xì)胞癌的鑒別診斷有意義。

       2.染色:入油紅0工作液孵育10-15min;細(xì)胞爬片破膜10-15min, PBS漂洗3次，5min次， 入油紅工作液37°C染色1-2h。

       3.分化: 75%酒精分化2s,水洗1min。

       4、復(fù)染細(xì)胞核: Harris蘇木素復(fù)染1-2min左右， 自來(lái)水洗，1%的鹽酸酒精分化數(shù)秒,自來(lái)水沖洗，氨水返藍(lán)，流水沖洗。

       5、封片:用紙巾吸去周邊水分，甘油明膠封片。

　　脂滴呈橘紅色至鮮紅色:細(xì)胞核呈深藍(lán)色。

       1.油紅0是對(duì)脂類(lèi)物質(zhì)進(jìn)行染色，石蠟切片在處理過(guò)程中脂類(lèi)物質(zhì)無(wú)法保存，所以石蠟切片不能進(jìn)行油紅0染色。

　　2.油紅0染液使用一段時(shí)間后，染出的脂滴顏色會(huì)偏黃，此時(shí)就需要更換染液。

　　3.油紅染色時(shí)，動(dòng)作要輕，因?yàn)橹我滓莆唬⑶以诜馄瑫r(shí)應(yīng)避免蓋玻片滑動(dòng)。

　　傳統(tǒng)配制油紅O染液   ,所用的丙酮和異丙醇極易揮發(fā),致使染液產(chǎn)生沉淀,染色時(shí)易在組織片上留下紅色的結(jié)晶,而影響結(jié)果的判斷。同時(shí)染液不易保存,每次染色時(shí)需要重新配制。我們經(jīng)實(shí)驗(yàn),采用50%乙醇作為溶解劑,減少了丙酮和異丙醇易揮發(fā)對(duì)人體的危害,染液不易產(chǎn)生沉淀;分化劑與油紅O染液中的溶劑性質(zhì)相似,這樣利于切片上多余染液的分化,故組織切片上沒(méi)有結(jié)晶產(chǎn)生。從而為病理診斷及鑒別診斷提供了可靠技術(shù)方法。組織常規(guī)用中性福爾馬林固定,但用甲醛—鈣液(40%甲醛10ml,蒸餾水90m1,氯化鈣1g)固定效果更好,這樣有利于保存磷脂。

　　封固顯示脂肪的切片時(shí),切片不宜太干,否則易產(chǎn)生氣泡。發(fā)現(xiàn)有氣泡,不能壓蓋玻片驅(qū)趕,因?yàn)檫@樣會(huì)使脂滴移位。若有氣泡可用溫水浸掉蓋玻片,而后再封固。

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